方法一：

1.用力不能太猛，要均匀吹打；

2.按顺序从上到下，从右到左，每个地方都吹到。

3.尽量不要吹起泡沫，有少量问题也不大。

4.吹打的次数有时候与胰酶有关系。我们一般是冷胰酶消化0.5-1min（A549，2BS，HepG2都试过了），15-20次也够了。过度吹打会损害细胞，会影响培养基的pH值...，但是，如果不充分吹打，消化后细胞还是有好多贴在壁上。在75ml培养瓶的不同部分吹打，总共15次，然后在解剖显微镜下观察，细胞99％吹打下来了，状态也不错。

方法二：

用预热胰酶加入1ml，然后倒掉0.5ml左右，再等待2min左右就可以了，大约吹打15次就OK

其实帖壁生长细胞消化传代并不是借助吹打的力量才使细胞离壁，关键是消化。

消化要到位，然后弃掉胰酶，加培养基，摇晃培养瓶，使细胞借助培养液打击的力量脱落。

然后用枪吹几次培养液，把仍没有成单个的细胞吹成单个。

我觉得这样对细胞损伤很小。

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