测量面积直径等几何尺寸时都用象素作为单位。如果你需要测量微观物体的准确几何尺寸，那就得进行标定操作后才行。还有一个需要标定的是光密度。这可就比几何标尺困难多了。在分析光密度参数时，较正光密度曲线是必须要作的。否则在进行灰度分析时肯定会出错。

标定标尺还需要有个物质准备，就是得有一个叫"微标尺"的小玻璃片。上面刻有准确的刻度，在1MM的长度上刻着100个分度刻度，这样这个小尺的每一格就是0.01MM。得在专业的显微镜生产商那才能买到，或者在买显微镜时把这个当作附件给买下来（就是有点贵，实际上，那是相当地贵）。如果没有这玩艺怎么办?还真有点难办。照理说如果有一个能放在载片上的尺寸已知的小东西也是可以的，这个东西首先得足够小，其次得准确知道它的尺寸。我现在能够想到的东西就是血球计数板。它的尺寸就是1平方毫米，分了几个大格和小格，大家可以自己算一下或者查一下这些线条的间距。线条精度虽然比不上微标尺，但误差也不会太大。可以凑合着用。上面说的是使用显微镜照片时用的标尺。如果你处理的是大个物体的照片，那就在物体边上放个米尺就行了。在拍摄物体的同时也把米尺的图象拍下来。

使用标尺的第一步就是拍摄微标尺的照片。拍一张是不行的。如果你的显微镜有4个物镜分别是4X、10X、40X、100X。那么就要分别拍摄下这四个镜头下的标尺图象。如果你的像机是非变焦镜头，还不错。不用管变焦的事。我的相机有五级变焦，其中光学变焦三级，数字变焦两级。而三级光学变焦中，两个短焦距变焦拍摄的图象亮度不均匀，不能用。数字变焦不予考虑。因为我固定使用一个焦距。否则每个变焦都要拍摄标尺照片。数码相机拍摄画面还有不同象素。分别是低、中、高三个档次。三种象素画面大小是不同的，因此也要分别拍摄它们的标尺图片。

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