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显微镜在常温下利用麻醉法观察动物形态
2016-03-15
      在偏光显微镜的日常使用中,各实验室显微镜冷冻置换的具体作法不同,下面介绍的是显微镜D. C. Pease实验室的方法,此法的优点是,冷冻与置换过程可在同一容器内完成,避免转换容器带来的麻烦。

      徕卡显微镜冷冻剂与置换剂均使用70%甘醉(Ethyleneglycol,水溶液)。将甘醉用干冰冷却到一770C.把新鲜样品投入其中,即可达到冷冻的目的.这里,甘醉可起冷冻保护剂作用。

      将甘醉温度升至一500C。在此温度下,甘醉不会冻结,并可将组织内的冰置换出来。在甘醇中的组织数小时内可变得透明,说明置换过程在进行中;为达到完全置换需要过夜。在这期间,最好不断摇动样品。偏光置换完成后,将样品转入纯的甘醇,以便样品中的水能完全脱出。

      显微镜经甘醉置换的组织可用轻乙基丙烯酸醋或9丙基丙烯酸酷包埋,因为甘醉可以与上述树酷直接混溶。如欲用环氧树脂包埋,数码组织则需通过氧化丙烯过渡.

      为了避免水溶性成份的移位和流失。显微镜冷冻置换后的样品在切片和染色时均不再接触水。为此,切片刀的槽液应使用甘醉。数码显微镜染色时可用磷钨酸或醋酸铀,两者均可溶于甘醉,因此,实际上采用的是负染法。染色后,显微镜将多余染液用滤纸吸去,把载网放入真空喷镀仪真空罩内,抽低真空(只开机械泵),使甘醉蒸发后,即可在数码显微镜下观察。

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