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暗视野显微镜概述
2016-08-10
一、暗视野显微镜原理与类型

1.透射式:透射式暗视野显微镜的聚光镜可采用中央有挡光片或干(湿)式专用暗场聚光镜,使照明光线不直接进人物镜,只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜,因而视野的背景是黑的,物体的边缘是亮的。利用这种显微镜能见到小至4~200nm的微粒子。
 
2.落射式:落射式暗视场显微镜是利用光学上的丁达尔原理,使通过聚光系统的光源中央光束被环形遮光板阻挡,不能由上而下地通过物镜照射在标本上。而是使照明光线倾斜地照射在观察标本上,标本遇光发生反射与散射,由于反射光线处于物镜的孔径之外而不能进入物镜,只有标本上各个方向上的散射光线被物镜所捕获,如果光路中没有物体时,整个视场是完全黑暗的。

 
二、暗视野显微镜的用途

透射型暗视场显微镜主要用于观察观察活细胞的结构和细胞内微粒的运动等。临床上,暗视野显微镜常用于检查苍白的螺旋体,这是一种病原体检查,对早期梅毒的诊断有十分重要的意义。落射式暗视野显微镜主要是现代的明/暗视场正置式或倒置式金相显微镜,其主要应用与优点是:

1.较高的分辨率。试样中的的透明颗粒在明视场下无法分辨,但是在暗视场下却成为自发光的,甚至尺寸小到0.006 μm(6nm)的颗粒都能分辨出。

2.较高的物象反差。在显微镜的照明系统中,物镜不再作为聚光镜,使眩光减少。

3.可以根据透明夹杂物的固有色彩进行鉴定,例如钢中的二氧化硅(SiO2)在明视场下呈暗黑色,但是在暗视场下则呈亮黄色。

4.在明视场下,经过化学腐蚀的试样,晶界为暗黑色,但是在暗视场下则为亮白色,更有利于用比较法进行晶粒度评级。   

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